(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210460058.9 (22)申请日 2022.04.28 (71)申请人 北京燕京啤酒股份有限公司 地址 101300 北京市顺 义区双河路九号 申请人 中轻检验认证有限公司 (72)发明人 郭立芸　刘秀　谢鑫　周鹏飞　 梁玉林　徐文文　宋玉梅　贾风超　 宋全厚　 (74)专利代理 机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 魏少伟 (51)Int.Cl. C12Q 1/689(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/6844(2018.01)C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 用于鉴定戊糖片球 菌的专用引物与试剂盒 (57)摘要 本发明公开了用于鉴定戊糖片球菌的专用 引物与试剂盒。 本发明公开的用于鉴定戊糖片球 菌的专用引物由名称分别为F3、 B3、 FIP、 BIP、 LF 和LB的引物组成， F3、 B3、 FIP、 BIP、 LF和LB分别为 序列表中序列1 ‑6所示的单链DNA。 本发明用于鉴 定戊糖片球菌的专用引物可以检测戊糖片球菌， 具有灵敏度高、 特异性强、 操作简单、 快速便捷 等 优点， 利用环介导等温扩增方法扩增戊糖片球菌 特异性基因片段， 填补了啤酒中戊糖片球菌LAMP 检测方法的空白， 本发明适用于酒厂基层应用和 现场快速 检测。 权利要求书2页 说明书7页 序列表2页 附图3页 CN 114854883 A 2022.08.05 CN 114854883 A 1.引物组， 由名称分别为F3、 B3、 FIP、 BIP、 LF和LB的引物组成； 所述F3为如下(a1)或(a2)： (a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子； (a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同 功能的DNA分子； 所述B3为如下(a3)或(a4)： (a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子； (a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同 功能的DNA分子； 所述FIP为如下(a5)或(a6)： (a5)序列表的序列3所示的单链DNA分子； (a6)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同 功能的DNA分子； 所述BIP为如下(a7)或(a8)： (a7)序列表的序列4所示的单链DNA分子； (a8)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同 功能的DNA分子； 所述LF为如下(a9)或(a10)： (a9)序列表的序列5所示的单链DNA分子； (a10)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同 功能的DNA分子； 所述LB为如下(a1 1)或(a12)： (a11)序列表的序列6所示的单链DNA分子； (a12)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同 功能的DNA分子 。 2.权利要求1所述引物组的下述任一应用： X1)制备鉴定或辅助鉴定戊糖片球菌试剂或试剂盒； X2)制备检测或辅助检测待测样本中是否含有戊糖片球菌试剂或试剂盒； X3)鉴定或辅助鉴定戊糖片球菌； X4)检测或辅助检测待测样本中是否含有戊糖片球菌 。 3.一种试剂， 包括权利要求1所述引物组。 4.根据权利要求3所述的试剂， 其特征在于： 所述试剂还包括进行LAMP反应所需的其他 试剂。 5.权利要求3或4所述试剂在鉴定或辅助鉴定戊糖片球菌中的应用； 或， 权利要求3或4所述试剂在检测或辅助检测待测样本 中是否含有 戊糖片球菌 中的应 用。 6.含有权利要求1所述引物组或权利要求3或4所述试剂的试剂盒； 所述试剂盒的用途 为如下(b1)或(b2)： (b1)鉴定或辅助鉴定戊糖片球菌； (b2)检测或辅助检测 待测样本中是 否含有戊糖片球菌 。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114854883 A 27.权利要求6所述试剂盒在鉴定或辅助鉴定戊糖片球菌中的应用； 或， 权利要求6所述试剂盒在检测或辅助检测待测样本中是否含有戊糖片球菌中的应 用。 8.一种鉴定或辅助鉴定戊糖片球菌的方法， 包括如下步骤： (1)提取待测微 生物的核酸； (2)以步骤(1)提取的核酸为模板， 采用权利要求1所述引物组进行环介导等温扩增； 如 果所述引物组可以实现以提取核酸为模板的特异 性扩增， 待测微生物为或候选为戊糖片 球 菌； 如果所述引物组不能实现以提取核酸为模板的特异性扩增， 待测微生物为或候选为非 戊糖片球菌 。 9.一种检测待测样本中是否含有戊糖片球菌的方法， 包括如下步骤： (1)提取待测样本的核酸； (2)以步骤(1)提取的核酸为模板， 采用权利要求1所述引物组进行环介导等温扩增； 如 果所述引物组可以实现以提取核酸为模板的特异 性扩增， 所述待测样本含有或候选含有戊 糖片球菌； 如果所述引物组不能实现以提取核酸为模板的特异性扩增， 所述待测样本不含 有或候选不含有戊糖片球菌 。 10.根据权利要求9所述的方法， 其特 征在于： 所述待测样本为啤酒样本 。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114854883 A 3