(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210452685.8 (22)申请日 2022.04.27 (71)申请人 南京农业大 学 地址 210095 江苏省南京市玄武区卫岗1号 (72)发明人 张瑞奇　卢春甜　范亚丽　穆换清　 邢莉萍　曹爱忠　 (74)专利代理 机构 南京天华专利代理有限责任 公司 32218 专利代理师 傅婷婷　徐冬涛 (51)Int.Cl. C12N 15/29(2006.01) C07K 14/415(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C12N 15/82(2006.01) A01H 5/00(2018.01)A01H 6/46(2018.01) C12Q 1/6895(2018.01) A01H 1/02(2006.01) (54)发明名称 一个簇毛麦全生育期广谱抗白粉病基因 Pm5V及其应用 (57)摘要 本发明属于基因工程领域， 公开了一个簇毛 麦全生育期广谱抗白粉病基因Pm5V及其应用。 Pm5V基因的CDS序列为SEQ  ID NO.1及其编码的 氨基酸序列为SEQ  ID NO.2。 该基因来自簇毛麦 (Dasypyrum  villosum)。 克隆Pm5V基因， 扩增引 物序列如SEQ  ID NO.3、 SEQ  ID NO.4、 SEQ  ID  NO.5、 SEQ ID NO.6。 本发明所述的具有簇毛麦全 生育期广谱抗白粉病的基因Pm5V在抵抗小白粉 病， 提高小麦抗病性， 且携带Pm5V基因的 T5DL.5VS易位系农艺性状优良， 对产量等重要 性 状没有负向效应， 育种利用价 值高。 权利要求书1页 说明书5页 序列表8页 附图5页 CN 114807167 A 2022.07.29 CN 114807167 A 1.具有簇毛麦全生育期广谱抗白粉病基因Pm5V， 其序列如SEQ  ID NO.1所示。 2.权利要求1所述的基因Pm5V编码的蛋白质， 其氨基酸序列为SEQ  ID NO.2。 3.权利要求1所述的基因Pm5V克隆序列引物为SEQ  ID NO.3、 SEQ  ID NO.4、 SEQ  ID  NO.5、 SEQ ID NO.6。 4.含有权利要求1所述的基因Pm5V的重组表达载体。 5.权利要求1所述的基因Pm5V在培 育抗白粉病小麦品种中的应用。 6.根据权利 要求5所述的应用， 其特征在于将其携 带Pm5V基因的小麦 ‑簇毛麦T5DL.5VS 易位系与不携带Pm5V基因的小麦品种杂交， 通过分子标记辅助选择， 培育携带Pm5V基因的 小麦新品种， 提高小麦的白粉病抗性； 所述的分子标记辅助选择使用SEQ  ID NO.3和SEQ  ID  NO.4所示的引物。 7.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于将权利要求1所述的基因Pm5V通过基因工程 手段导入易感白粉病小麦品种中， 以提高其对白粉病的抗 性。 8.权利要求 4所述的重组表达载体在培 育抗白粉病小麦品种中的应用。 9.一种基 因Pm5V的分子标记引物， 其特征在于由SEQ  ID NO.3和SEQ  ID NO.4所示的引 物P1和P2、 SEQ  ID NO.5和SEQ  ID NO.6组成。 10.权利要求9所述的分子标记引物在小麦抗白粉病育种中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114807167 A 2一个簇毛麦全生育期广谱抗白粉病基因Pm5V及其应用 技术领域 [0001]本发明属于基因工程领域， 公开了一个簇毛麦全生育期广谱抗白粉病基因Pm5V及 其应用。 背景技术 [0002]小麦是一种世界性粮食作物， 其适应性强、 分布范围广， 为超过三分之一的人类提 供主要能量来源， 小麦的产量和品质直接关系到全人类的食物安全。 由小麦白粉菌 (Blumeria  graminis f.sp tritici)引起的小麦白粉病是小麦主要的病害之一。 它属于专 化寄生， 可以在 整个生育期 侵染小麦的叶部、 茎 秆、 穗部等， 其中主要危害小麦叶片， 严重时 影响小麦正常的光合作用， 从而影响其正常的生长， 降低产量。 近十年， 我国小麦白粉病发 病面积每年在667万hm2以上， 造成年均损失产量约1000万吨， 严重威胁 我国小麦的安全生 产， 因此小麦白粉病的防治越来越受到人们的关注。 [0003]抗病基因的挖掘和抗病品种的培育是防治小麦白粉病最可持续的策略。 然而单一 抗源抗性的频繁丧失， 使育种工作总 是在被动地追赶病原菌小种的变化， 严重制约着小麦 产量和品质水平的进一步提高。 因此， 需要发掘新类型抗源， 提高抗病基因的遗传多样性， 有利于保持小麦品种抗白粉病的持久性。 [0004]全生育期广谱抗白粉病基因Pm5V定位于簇毛麦01I140染色体臂5VS， 高抗我国目 前所有白粉菌生理小种(范亚丽， 2020)。 通过创制小麦 ‑簇毛麦T5DL.5VS易位系， 已将Pm5V 基因导入普通小麦遗传背景， 创制了不同遗传背景的抗病 新品系。 利用不同T5DL.5VS易位 系构建遗传分离群体， 对Pm5V基因进行了精细定位分析(穆换清， 2021)。 进一步对携带Pm5V 基因的5VS染色体臂分拣测序， 结合定位区间、 基因沉默等功能分析， 实现了Pm5V基因的图 位克隆。 携带Pm5V基因的T5DL.5VS易位系农艺性状优良， 对产量等重要性状 没有负向效应， 育种利用价 值高， 并开发了易于鉴定Pm5V基因的分子标记， 将加快 该基因的育种利用。 发明内容 [0005]本发明的目的是公开一个簇毛麦全生育期广谱抗白粉病基因Pm5V及其育种利用 方法。 [0006]本发明所述的Pm5V基因的DNA序列位于簇毛麦5VS染色体上， DNA序列全长是 3804bp， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示， 编码12 67个氨基酸， 氨基酸序列如SEQ  ID NO.2 所示。 [0007]本发明所述的Pm5V基因， 扩增引物序列如SEQ  ID NO.3、 SEQ  ID NO.4、 SEQ  ID  NO.5、 SEQ ID NO.6。 [0008]含有所述的基因Pm5V的重组表达载体。 [0009]所述的基因Pm5V在培 育抗白粉病小麦品种中的应用。 [0010]作为本发明的一种优选， 将其携带Pm5V基因的小麦 ‑簇毛麦T5DL.5VS易位系与不 携带Pm5V基因的小麦品种杂交， 通过分子标记辅助选择， 培育携带Pm5V基因的小麦新品种，说　明　书 1/5 页 3 CN 114807167 A 3