(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210454385.3 (22)申请日 2022.04.27 (71)申请人 江苏省人民医院 （南京医科 大学第 一附属医院） 地址 210000 江苏省南京市 鼓楼区广州路 300号 (72)发明人 蔡卫华　杨思亭　刘蔚　葛旭辉　 唐鹏宇　 (74)专利代理 机构 南京业腾知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 32321 专利代理师 周姗姗 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12N 9/00(2006.01)C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种与人骨 肉瘤相关的分子标记物TRIM22 及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种与人骨肉瘤相关的分子 标记物TRIM22， 所述TRIM22的氨基酸序列如SEQ   ID No.1所示。 发明人通过 实验研究发现： 骨肉瘤 组织中TRIM22蛋白的表达显著低于正 常骨组织； 过表达骨肉瘤细胞中TRIM22的表达可以降低骨 肉瘤细胞体外增殖、 克隆形成能力、 侵袭转移能 力， 且可以降低骨肉瘤体内增殖及侵袭转移能 力； TRIM22蛋白可以与NRF2蛋白相结合并提高其 泛素化水平， NRF2在骨肉瘤中高度表达， 并且与 TRIM22表 达量呈明显负相关。 这些研究结果表明 TRIM22可以作为骨肉瘤的分子标志物， 应用于骨 肉瘤的辅助诊断、 疗效预测及预后判断。 这对于 骨肉瘤的早期诊断和预后评估具有重要的意 义。 权利要求书1页 说明书10页 序列表4页 附图7页 CN 114774546 A 2022.07.22 CN 114774546 A 1.一种与人骨肉瘤相关的分子标记物TRIM22， 其特征在于， 所述TRIM22的氨基酸序列 如SEQ ID No.1所示。 2.权利要求1所述分子标记 物TRIM22在制备骨肉瘤诊断或预后评估产品上应用。 3.检测权利要求1所述分子标记物TRIM22的表达水平的试剂在制备骨肉瘤诊断或预后 评估产品上的应用。 4.如权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述试剂包括： 用RT ‑PCR检测所述分子标记 物表达水平的特异性扩增引物， 所述引物序列为： TRIM22‑F:5’ ‑TCCGCATAAACGAGGTGGTC‑3’ TRIM22‑R:5’ ‑GTCTCTCGATCT TCCAGGCG‑3’。 5.一种用于早期诊断、 预后评估骨肉瘤的试剂盒， 其特征在于， 包括通过RT ‑PCR检测分 子标记物TRIM22表达水平的试剂， 所述分子标记 物的氨基酸序列如SEQ  ID No.1所示。 6.如权利要求5所述的用于早期诊断、 预后评估骨肉瘤的试剂盒， 其特征在于， 所述试 剂包括特异性扩增分子标记 物TRIM22的引物， 所述引物序列为： TRIM22‑F:5’ ‑TCCGCATAAACGAGGTGGTC‑3’ TRIM22‑R:5’ ‑GTCTCTCGATCT TCCAGGCG‑3’。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114774546 A 2一种与人骨肉瘤相关的分子标记物TRIM2 2及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一种与人骨肉瘤相关的分子标记物 TRIM22及其应用。 背景技术 [0002]骨肉瘤(Osteosarcoma， OS)是一种起源于间质细胞的恶性骨肿瘤， 主要发生于儿 童和青少年中， 约占小儿患者所有恶性肿瘤的2.4％， 病 死率极高。 骨肉瘤常发生于胫骨近 端、 肱骨近端和股骨远端的干骺端区域， 具有高度侵袭性， 中晚期常伴有肺部转移。 尽管过 去数十年中医疗技术包括手术方式、 理念及放化疗技术得到迅速发展， 由于肺转移及耐药 等原因， 骨肉瘤的五年生存率依然很低。 实际上， 由于目前仍然没有有效的治疗方法， 伴有 转移的骨肉瘤患者的总体生存率相当低， 大约在10％ ‑20％之间。 因此， 充分理解骨肉瘤发 生发展的深层生物学机制， 早期筛查诊断骨肉瘤具有重要意 义。 [0003]泛素化修饰是最常见的蛋白质翻译后修饰之一， 其通过调节蛋白质稳定性、 信号 传递、 DNA修复等过程参与了一系列生物活动。 大多数促癌或抑癌的蛋白都受到翻译后修 饰， 尤其是泛素化修饰的调控。 TRIM(Tripartite  motif‑containing)蛋白家族是RING  E3 泛素连接酶家族的一个亚家族， 目前共发现70多种TRIM蛋白。 已有研 究证明TRIM家族蛋白 在多种生物学过程包括转录调控、 细胞增殖、 细胞转移、 细胞凋亡、 肿瘤形成等中发挥重要 作用。 然而， 到目前为止， 关于骨肉瘤中TRIM蛋 白家族的相关研究甚少。 TRIM22是TRIM蛋 白 家族的重要一员， 其最初被鉴定为IFN诱导蛋白， 同时也是TP53的转录靶点。 某些参与重要 生物学过程的蛋白包括IκBα、 NS5A和NOD被证明是TRIM22的底物蛋白。 之前的文献报道 TRIM22可以通过降解IκBα 激活胶质瘤细胞中的NF ‑κB信号通路。 另一项研究表明， TRIM22可 以通过其核定位的RING结构域抑制HBV相关基因表达水平。 然而， 关于TRIM22在骨肉瘤中的 具体功能作用及其潜在生物学机制尚不清楚。 [0004]目前骨肉瘤的治疗手段只能稍微延长患者生存期， 且诊断也要综合病史、 影像学 检查及穿刺活检病理学检查等， 因此发展新的治疗手段和特异 性高的分子诊断标记物成为 防治骨肉瘤的迫切需求。 因此本研究旨在通过肿瘤标志物试剂盒检测骨肉瘤患者分子病理 变化， 可以做到早期筛查及辅助诊断， 从而提高骨肉瘤患者的总体生存率。 发明内容 [0005]本发明的目的在于解决现有技术中骨肉瘤诊断技术的不足， 提供一种能早期检测 骨肉瘤的分子标记 物， 对骨肉瘤的早期诊断和预后评估具有重要的意 义。 [0006]技术方案 [0007]一种与人骨肉瘤相关的分子标记物TRIM22， 所述TRIM22的氨基酸序列如SEQ  ID  No.1所示。 [0008]SEQ ID No.1: [0009]MDFSVKVDIEKEVTCPICLELLTEPLSLDCGHSFCQACITAKIKESVIISRGESSCPVCQTRFQP GNL说　明　书 1/10 页 3 CN 114774546 A 3