(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210434284.X (22)申请日 2022.04.24 (71)申请人 河南农业大 学 地址 450046 河南省郑州市郑东 新区平安 大道218号 (72)发明人 库丽霞　苏慧慧　陈彦惠　任真真　 (74)专利代理 机构 郑州优盾知识产权代理有限 公司 41125 专利代理师 冉珊敏 (51)Int.Cl. C07K 14/415(2006.01) C12N 15/29(2006.01) C12N 15/82(2006.01) C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种调控玉米耐盐的正向调控因子及其 InDel分子标记和应用 (57)摘要 本发明属于作物遗传育种领域， 涉及 玉米耐 盐的调控因子， 特别是指一种调控玉米耐盐的正 向调控因子及其InDel分子标记和应用。 所述正 向调控因子包含CCT家族保守功能结构域。 所述 正向调控因子为基因ZmPRR3 7， 其碱基序列如SEQ   ID NO.1所示。 所述基因ZmPRR3 7的编码区域存在 插入/缺失的碱基突变， 如图1所示。 由688个氨 基 酸序列如SEQ  ID No.6所示， 组成包含CCT家族保 守功能结构域的转录因子， 其分子生物学功能 目 前在玉米中尚未报道。 本发明研究了该基因调控 玉米耐盐的分子生物学功能， 并为选育耐盐的优 良高产玉米新品种提供了一个潜在的新基因资 源。 权利要求书1页 说明书4页 序列表6页 附图2页 CN 114736277 A 2022.07.12 CN 114736277 A 1.一种调控玉米耐盐的正向调控因子， 其特征在于： 所述正向调控因子包含CCT家族保 守功能结构域。 2. 根据权利要求1所述的正向调控因子， 其特征在于： 所述正向调控因子为基因 ZmPRR37， 其碱基序列如SEQ  ID NO.1所示。 3. 权利要求2所述的正向调控因子的InDel分子标记， 其特征在于： 所述InDel分子标 记位于基因ZmPR R37的下游第13 60与1361碱基之间， 序列如SEQ  ID NO.7所示。 4. 用于鉴定权利要求3所述的InDel分子标记的引物对， 其特征在于： 所述引物对为 PRR37‑F2和PRR37 ‑R2， 其中PRR37 ‑F2序列如SEQ  ID NO.4所示， PRR37 ‑R2序列如SEQ  ID  NO.5所示。 5.权利要求3所述的I nDel分子标记在玉米耐盐性预测 和筛选中的应用。 6.权利要求1或2所述的正向调控因子在调控玉米耐盐性中的应用， 其特征在于， 步骤 为： （1） 构建基因ZmPR R37的过表达载体； （2） 将步骤 （1） 的过表达载体转化农杆菌感受态细胞， 用于转化玉米自交系B104， 得到 耐盐性强的转基因阳性株。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于： 所述步骤 （1） 中过表达载体的获得是以耐 盐性自交系CML288的cDNA为模板， 以玉米自交系B73的PRR37的cDNA序列设计的引物对为引 物构建而得。 8. 根据权利要求7所述的应用， 其特征在于： 所述引物对为PRR37 ‑F1和PRR37 ‑R1， 其中 PRR37‑F1序列如SEQ  ID NO.2所示， PR R37‑R1序列如SEQ  ID NO.3所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114736277 A 2一种调控玉米耐盐的正向调控因 子及其InDel分子标记和 应用 技术领域 [0001]本发明属于作物遗传育种领域， 涉及玉米耐盐的调控因子， 特别是指一种调控玉 米耐盐的正向调控因子及其 InDel分子标记和应用。 背景技术 [0002]自然界中的植物常受到低温、 高温、 干旱、 水涝、 盐碱、 大气污 染等不良环境因素胁 迫， 胁迫因子相互关联且常伴随出现， 如高温和干旱、 高盐和干旱常伴 随发生。 土壤盐渍化 是限制农业发展的一项重要生态因素， 始终影响着植物的整个生命周期， 其对植物的影响 是一个综合复杂的过程。 土壤中高浓度的盐分离子不仅造成土壤水势下降,推迟或抑制作 物种子萌发,而且还会抑制该环境中的作物幼 苗根、 茎、 叶、 花、 果 实等器官的生长发育和代 谢过程， 使作物生长受到抑制， 从而导致作物产量降低， 品质下降， 对国家粮食安全和农民 收入造成损失。 世界上盐碱面积 很大， 估计占灌溉农田 的1/3， 而且随着灌溉农业的发展， 盐 碱面积将继续扩大。 我国盐碱土分布于西北、 华北、 东北和沿海地区， 盐碱土面积约2~7× 107ha， 而且这些地区都属平原， 盐地土层深厚， 如能改良盐碱危害， 发展农业 的潜力很大。 随着全球气候变暖， 我国降雨量持续减少， 作为农业用水的淡水资源日益紧缺， 同时还存在 因长期低标准化灌溉而导致的土地次生盐渍化等问题。 专利202010914857.X中公开了一种 水稻的调控因子， 该调控因子通过负向调控使水稻栓质沉积， 提高耐盐性； 而在玉米中并没 有直接筛选到与玉米耐盐相关的调控因子， 而玉米耐盐基因在分子育种上的应用对我国的 粮食安全具有重大意 义。 发明内容 [0003]为解决上述技术问题， 本发明提出一种调控玉米耐盐的正向调控因子及其InDel 分子标记和应用。 [0004]本发明的技 术方案是这样实现的： 一种调控玉米耐盐的正向调控因子， 所述正向调控因子包含CCT家族保守功能结 构域。 [0005]进一步， 所述正向调控因子为基因ZmPR R37， 其碱基序列如SEQ  ID NO.1所示。 [0006]进一步， 所述基因ZmPR R37的编码区域存在插 入/缺失的碱基突变， 如图1所示。 [0007]上述的正向调控因子的InDel分子标记， 位于ZmPRR37的下游区域， 在耐盐性自交 系CML288和非耐盐性自交系 黄早4间存在一个1073bp的InDel， 所述InDel分子标记位于基 因ZmPRR37的下游第13 60与1361碱基之间； I nDel分子标记序列如SEQ  ID NO.7所示。 [0008]用于鉴定上述的InDel分子标记的引物对， 所述引物对为PRR37 ‑F2和PRR37 ‑R2， 其 中PRR37‑F2序列如SEQ  ID NO.4所示， PR R37‑R2序列如SEQ  ID NO.5所示。 [0009]上述的InDel分子标记在玉米耐盐性预测 和筛选中的应用。 [0010]上述的正向调控因子在调控玉米耐盐性中的应用， 步骤为：说　明　书 1/4 页 3 CN 114736277 A 3