(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211028956.3 (22)申请日 2022.08.26 (71)申请人 北京肿瘤医院 （北京大 学肿瘤医院） 地址 100048 北京市海淀区阜成路52号 (72)发明人 曹放　黄小征　周立新　 (74)专利代理 机构 北京中和立达知识产权代理 有限公司 1 1756 专利代理师 杨磊 (51)Int.Cl. G01N 1/28(2006.01) G01N 1/34(2006.01) G01N 1/44(2006.01) (54)发明名称 一种恶性 黑色素瘤进行脱色素的方法 (57)摘要 本发明涉及一种恶性黑色素瘤进行脱色素 的方法， 该方法通过使用3%过氧化氢加Tri s‑HCl 缓冲液与硼酸盐缓冲液混合加热对样本中的黑 色素进行脱色， 即能很好地与我们免疫组化自动 化检测平台融合， 同时又对细胞的形态、 结构和 细胞内分子影 响最小， 不影 响后续的免疫组化检 测， 可有效辅助黑色素瘤疾病的诊 疗。 权利要求书1页 说明书4页 附图5页 CN 115096682 A 2022.09.23 CN 115096682 A 1.一种黑色素瘤脱色试剂， 其特征在于， 所述试剂包含： 3%过氧化氢加Tris ‑HCl缓冲液 与0.01M硼酸盐缓冲液混合。 2.一种对恶性 黑色素瘤进行脱色素的方法， 其特 征在于， 所述方法包括如下步骤： 黑色素瘤组织样本进行脱蜡处 理； 将脱蜡处理后的组织样本与权利要求1所述的脱色试剂在90℃的温度下接触， 使组织 内的黑色素 逐渐消失。 3.权利要求1所述的脱色试剂或权利要求2所述的方法在制备用于诊断黑色素瘤的产 品中的应用。 4.如权利要求3所述的应用， 其特 征在于， 所述产品为试剂或试剂盒。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115096682 A 2一种恶性黑色素瘤 进行脱色素的方 法 技术领域 [0001]本发明属于检测技术领域， 具体的， 本发明涉及一种恶性黑色素瘤进行脱色素的 方法。 背景技术 [0002]恶性黑色素瘤是病理科日常工作中总是会不时遇到的一类肿瘤， 尤其是在肿瘤专 科医院。 随着临床诊疗的需要， 病理医生不仅需要对这类疾病做出正确的诊断， 还需要对它 的生物学行为， 包括核分裂像、 浸润的深度、 治疗后肿瘤消退评级以及蛋白分子特征等等多 个方面进行评 定。 [0003]DAB(二氨基联苯胺)是免疫组化染色常用的染色剂底物， 可在过氧化氢的存在下 失去电子而 呈现出颜色变化的积累， 形成浅棕色不溶产 物。 用于检测过氧化物酶的活性， 灵 敏度高， 特异性好， 是辣根过氧化物酶 （HRP） 结合物最常用的底物， 常用于进行细胞或组织 染色检测。 然而因为黑色素瘤中往往有大量的黑色素沉积， 这些黑色素不仅遮盖了正常的 组织结构和细胞形态， 而且它们的颜色与DAB显 色剂所产生的黄 色近似， 会导致结果难以区 分。 虽然有一些替代的免疫组化染色底物如3 ‑氨基‑9‑乙基咔唑 （AEC） ， 该底物显色后为红 色， 可以避免颜色上的交叉， 但是该底物染色为 非常规免疫组化技术， 并不是所有的抗体均 能适用这种技术； 另外HRP /AEC光稳定性差， 在光照下容易褪 色， 不适用切片的长期保存。 在 免疫组化染色之前对切片进行黑色素脱色素处理， 而不对免疫组化染色技术本身进行改 动， 这种处 理技术更符合临床上较大工作量的实际需求以及自动化免疫组化染色流 程。 [0004]最早的黑色素脱色技术始于1897年， 最初采用0.1%高锰酸钾进行氧化脱色素， 随 后在不同的实验条件下多种脱色方法得以发展， 然而仅有两种脱色方法因为脱色效果较好 以及较强的可操作性而常被使用。 这两种 方法分别为高锰酸钾 ‑草酸脱色法和过氧化氢脱 色法。 这两种方法均利用了黑色素在碱性溶液中是可溶 的特性， 能够较为彻底地对黑色素 颗粒进行溶解。 虽然目前针对这两种脱色方法的研究较多， 但是在不同的实验条件下， 这两 种方法仍有 各自的局限性， 如 脱色时间过长、 脱色 效果不稳定、 酸碱环境影响后 期免疫组化 染色以及高温导致组织结构破坏、 染色出现脱片现象等等。 另外， 在临床病理的实际操作过 程中， 往往需要对福尔马林固定的切片进行脱色素处理， 并且后期 需要跟自动化免疫组化 程序进行对接， 因此需要一种简单易行、 但又脱色效果稳定的技 术来满足临床需求。 发明内容 [0005]为了弥补现有技术的缺陷， 本发明提供一种对恶性黑色素瘤进行脱色素的方法， 该方法既能很好地与自动化免疫组化检测平台融合， 同时又对细胞的形态、 结构和细胞内 分子影响最小， 不影响后续的免疫组化检测。 为了实现上述技术效果， 本发明提供如下的技 术方案： 本发明的第一个方面， 提供一种黑色素瘤脱 色试剂， 所述试剂包含： 3%过氧化氢加 Tris‑HCl缓冲液与0.01M硼酸盐缓冲液。说　明　书 1/4 页 3 CN 115096682 A 3