(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210882515.3 (22)申请日 2022.07.26 (71)申请人 华中科技大 学同济医学院附属协和 医院 地址 430022 湖北省武汉市解 放大道127 7 号 (72)发明人 吴蔚　金鑫　黄欣　浦飞飞　 邵增务　 (74)专利代理 机构 济南驯致 一川知识产权代理 事务所 (特殊普通合伙) 37396 专利代理师 王砚雷 (51)Int.Cl. C07K 19/00(2006.01) A61K 38/17(2006.01)A61K 47/64(2017.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种小分子肽及其作为激动 剂、 以及在抗癌 药物中的应用 (57)摘要 本发明公开了一种小分子肽及其作为激动 剂、 以及在抗癌药物中的应用， 主要涉及生物工 程领域。 以PD ‑L1的氨基酸序列270 ‑284为模板， 与绿色荧光蛋白融合， 构建并获得PD ‑L1蛋白 S279D高磷酸化小肽Pep tide。 可作为激动剂竞争 性抑制PD ‑L1与IGFBP3的蛋白质水平相互作用， 以便维持IGFBP3蛋白的抑癌功能。 权利要求书1页 说明书7页 附图4页 CN 115433287 A 2022.12.06 CN 115433287 A 1.一种小分子肽 ， 其特征在于 ， 所述小分子肽的氨基酸序列为FITC ‑C6‑ KKCGIQDTNDKKQSD。 2.如权利要求1所述的一种小分子肽， 其特征在于， 所述小分子肽为以PD ‑L1的氨基酸 序列270‑284为模板合 成小肽， 将位点279S突变为高磷酸化状态的279D， 与绿色荧光蛋白融 合， 构建并获得P D‑L1蛋白S279D高磷酸 化小肽Peptide。 3.权利要求1或2所述的一种小分子肽 在作为IGFBP3蛋白特异性激动剂的应用。 4.权利要求1或2所述的一种小分子肽 在作为抗癌药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115433287 A 2一种小分子肽及其作 为激动剂、 以及在抗癌药物中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物工程领域， 具体是一种小分子肽及其作为激动剂、 以及在抗癌药 物中的应用。 背景技术 [0002]PD‑L1单抗的应用在多种恶性肿瘤中取得了令人满意的治疗效果， 但对骨肉瘤 (OS)的治疗效果不尽人意。 近年来研究发现PD ‑L1除了大家熟悉的免疫调节作用外， 其非免 疫功能在 恶性肿瘤的发生发展中起重要作用。 但是骨肉瘤(OS)细胞内PD ‑L1通过其在279位 点的磷酸 化作用能够与IGFBP3相结合。 [0003]如果对骨肉瘤细胞内提取出来的蛋白质进行质谱分析， 可以发现其在蛋白质水平 可以与IGFBP3蛋白发挥相互作用； 该相互作用包括： 内源性细胞内的PD ‑L1可以和IGFBP3结 合(通过在MNNG/HOS和U ‑2OS骨肉瘤细胞中进行免疫共沉淀(Co ‑IP)实验， 利用IGFBP3抗体 去富集沉淀IGFBP3蛋白， 结果发现PD ‑L1可以被沉淀下来而被证明)； 细胞内的PD ‑L1可以和 IGFBP3结合(通过利用PD ‑L1抗体去富集沉淀PD ‑L1蛋白， IGFBP3也可以被沉淀下来而被证 明)。 [0004]根据Pubmed上的基因和蛋白序列信息， 将PD ‑L1蛋白划分为四个肽段， (A肽段1 ‑ 17， B肽段17 ‑148， C肽段149 ‑244， D肽段245 ‑290)； 利用生物学技术构建A肽段1 ‑17， B肽段 17‑148， C肽段 149‑244， 只有D肽段245 ‑290序列可以将I GFBP3沉淀下来， 这说明两者结合位 点可能发生在PD ‑L1的245‑290序列。 通过 dataset分析以及在MNNG/ HOS骨肉瘤细胞中进行免疫共沉淀(Co ‑IP)实验验证， 确定PD ‑L1通过其279位点的磷酸化与 IGFBP3相结合。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种小分子肽及其作为激动剂、 以及在抗癌药物中的应 用， 它可以竞争性抑制PD ‑L1与IGFBP3的蛋白质水平相互作用， 以便维持IGFBP3蛋白的抑癌 功能。 [0006]本发明为实现上述目的， 通过以下技 术方案实现： [0007]一种小分子肽， 所述小分子肽的氨基酸序列为FITC ‑C6‑KKCGIQDTNDKKQSD。 [0008]所述小分子肽为以PD ‑L1的氨基酸序列270 ‑284为模板合成小肽， 将 位点279S突变 为高磷酸化状态的279D， 与绿色荧光蛋白融合， 构建并获得PD ‑L1蛋白S279D高磷酸化小肽 Peptide。 [0009]上述小分子肽 在作为IGFBP3蛋白特异性激动剂的应用。 [0010]上述小分子肽 在作为抗癌药物中的应用。 [0011]对比现有技 术， 本发明的有益效果在于： [0012]IGFBP3蛋白作为抑癌蛋白， 本小 分子肽能为其提供特异性针对IGFBP3蛋白的激动 剂； 可以维持IGFBP3的抑癌功能从而对骨肉瘤起到良好的治疗效果。 从而在抗癌药物中能说　明　书 1/7 页 3 CN 115433287 A 3