(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211082674.1 (22)申请日 2022.09.06 (71)申请人 中国医学 科学院生物医学工程研究 所 地址 300192 天津市南 开区白堤路23 6号 (72)发明人 董霞　吕丰　于旭亚　李稳　张燕　 张琳华　马桂蕾　朱敦皖　梅林　 (74)专利代理 机构 北京酷爱智慧知识产权代理 有限公司 1 1514 专利代理师 刘志刚 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01) A61K 31/706(2006.01) A61K 41/00(2020.01) A61K 47/42(2017.01)A61K 47/68(2017.01) A61K 49/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 37/04(2006.01) (54)发明名称 一种搭便车中性粒细胞的药物递送体系及 其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种搭便车中性粒细胞的药 物递送体系及其制备方法和应用， 该制备方法包 括将还原型谷胱甘肽溶液和牛血清白蛋白溶液 进行混合并搅拌处理； 向混合溶液中添加DAC进 行反应， 再添加无水乙醇， 透析， 得到DAC纳米颗 粒， 再负载N ‑羟基琥珀酰亚胺修饰的近红外荧光 试剂， 得到负载近红外荧光试剂的DA C纳米颗粒； 然后与巯基化的SMCC进行孵育， 加入TPCE还原的 CD11b抗体进行孵育； 该制备方法通过IR820和 CD11b修饰纳米粒， 实现影像引导和中性粒搭便 车靶向递送， 达到精准递送目的； 同时负载地西 他滨， 使其与IR820 联用， 实现药物联合光热疗法 引发肿瘤细胞焦亡进而利用免疫细胞杀伤肿瘤 的治疗； 此外， 该制备方法实现简单、 效率高、 效 果好、 达到了应用的要求。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115364244 A 2022.11.22 CN 115364244 A 1.一种搭便车中性粒细胞的药物递送体系的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (a)将还原型谷胱甘肽溶 液和牛血清白蛋白溶 液进行混合并搅拌处 理， 得到混合溶 液； (b)向混合溶液中添加DAC进行反应， 待反应结束， 向反应液中添加无水乙醇， 再进行透 析， 得到DAC纳米颗粒， 再将DAC纳米颗粒与N ‑羟基琥珀酰亚胺修饰的近红外荧光试剂共孵 育， 得到负载近红外荧 光试剂的DAC纳米颗粒； (c)将负载近红外荧光试剂的DAC纳米颗粒与巯基化的SMCC进行孵育， 待孵育结束后， 加入TPCE还原的CD1 1b抗体进行孵 育， 即得所述搭便车中性粒细胞的药物递送体系。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(a)中， 牛血清白蛋白溶液和 还原型谷胱甘肽溶液的体积比为(0.8～1.2)∶ 1； 还原型谷胱甘肽与牛血清白蛋白的摩尔比 为(1～1.5)∶1； 牛血清白蛋 白溶液浓度为10～20mg/mL； 还原型谷胱甘肽溶液的pH值为8～ 8.5。 3.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(b)中， 反应温度为室温， 反 应时间为10～120mi n。 4.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(b)中， 向混合溶液中添加 DAC进行反应具体包括： 将含有DAC的二甲基亚砜溶液添加到混合溶液中进行反应， 其中， 含有DAC的二甲基亚 砜溶液添和混合溶液的体积比为1∶(18～22)； 含有DAC的二甲基亚砜溶液的浓度为1 ‑5mg/ mL。 5.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述N ‑羟基琥珀酰亚胺修饰的近红外 荧光试剂与牛 血清白蛋白的摩尔比为(0.8～1.2)∶ 1。 6.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(c)中， 巯基化的SMCC与 CD11b抗体的摩尔比为(1～1.5)∶ 1； CD11b抗体与牛 血清白蛋白质量比为1∶(6 0～80)。 7.权利要求1～6任一所述的制备 方法制得的搭便车中性粒细胞的药物递送体系。 8.权利要求1～6任一所述的制备方法制得的搭便车中性粒细胞的药物递送体系在制 备免疫联合 光热治疗肿瘤药物中的应用。 9.一种免疫联合光热治疗肿瘤药物， 其特征在于， 包括权利要求1～6任一所述的制备 方法制得的搭便车中性粒细胞的药物递送体系。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115364244 A 2一种搭便车中性粒细胞的药物递 送体系及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及医药技术领域， 具体涉及一种搭便车 中性粒细胞的药物递送体系及其 制备方法和应用。 背景技术 [0002]对于生长致密且免疫原性低的肿瘤来说， 如何防止术后复发和转移是肿瘤治疗面 临的巨大挑战之一。 精准有效的递送系统的问题是 药物的靶向递送和影 像引导递送。 [0003]搭便车体内细胞的肿瘤靶向方法为主动靶向提供了一种新的可能。 手术切除肿瘤 后， 肿瘤残余部位是一种急性炎症微环境， 体内中性粒细胞能被炎症因子激活并趋 向炎症 部位。 且人体内中性粒细胞是最丰富的循环白细胞， 利用中性粒细胞特有的趋化特性靶向 术后肿瘤急性炎症微环境为防止术后复发和转移 提供了一种思路。 中性粒细胞激活后表面 抗原CD11b表达显著上调， 利用CD11b抗体修饰纳米粒可以赋予纳米粒与中性粒细胞结合的 能力， 从而搭便车中性粒细胞靶向残余肿瘤。 中性粒细胞到达残余肿瘤后可以通过释放细 胞外陷阱或凋亡等方式将细胞内物质释放到肿瘤部位。 I R820作为近红外光敏剂， 在近红外 区域显示出强荧光， 并能够与生物自发荧光区分开， 为药物精准递送提供了可视化导航功 能。 [0004]有鉴于此， 特提出本发明。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种搭便车中性粒细胞的药物递送体系及其制备方法和 应用， 该制备方法制得的药物递送体系采用CD11b抗体偶联的牛血清白蛋白作为载体， 能够 在体内被激活的中性粒细胞识别并通过搭便车中性粒细胞的方式主动靶向肿瘤， 通过 IR820影像引导， 有效提高了药物对肿瘤的精准靶向效率， 并通过近红外光热剂与去甲基化 药物联合使肿瘤 细胞发生焦亡达 到激活全身免疫活性的目的。 [0006]为了实现本发明的上述目的， 特采用以下技 术方案： [0007]本发明第一方面提供一种搭便车中性粒细胞的药物递送体系的制备方法， 所述制 备方法包括如下步骤： [0008](a)将还原型谷胱甘肽溶液和牛血清白蛋白溶液进行混合并搅拌处理， 得到混合 溶液； [0009](b)向混合溶液中添加地西他滨(DAC)进行反应， 待反应结束， 向反应液中添加 无 水乙醇， 再进行透析， 得到DAC纳米颗粒， 再将DAC纳米颗粒与N ‑羟基琥珀酰亚胺修饰的近红 外荧光试剂共孵 育， 得到负载近红外荧 光试剂的DAC纳米颗粒； [0010](c)将负载近红外荧光试剂的DAC纳米颗粒与巯基化的SMCC进行孵育， 待孵育结束 后， 加入TPC E还原的CD1 1b抗体进行孵 育， 即得所述搭便车中性粒细胞的药物递送体系。 [0011]地西他滨(DAC)是一种天然2 ′ ‑脱氧胞苷酸的腺苷类似物， 通过抑制DNA甲基转移 酶， 减少DNA的甲基化， 是目前发现的最强的DNA去甲基化药物， 最近的研究显示低剂量的说　明　书 1/5 页 3 CN 115364244 A 3