(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221087475 0.6 (22)申请日 2022.07.25 (71)申请人 郑州大学第一附属医院 地址 450000 河南省郑州市二七区建 设东 路50号 申请人 华北水利水电大 学 (72)发明人 吴爽　周佩　于书淳　王莉　 王继萍　李仁杰　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 易昂 (51)Int.Cl. A61K 49/00(2006.01) A61K 47/22(2006.01) A61K 47/18(2006.01) A61K 47/02(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种水相自发荧 光叶酸载体的制备方法 (57)摘要 本发明提供了一种水相自发荧光叶酸载体 的制备方法， 属于功能材料和生物材料技术领 域。 本发明利用叶酸分子表面的羧基与1 ‑(3‑二 甲基氨基丙基) ‑3‑乙基碳二亚胺反应生成不稳 定的O‑酰基脲； 同时加入N ‑羟基琥珀酰亚胺减少 水解的发生， 生成具有氨基反应活性的活泼酯； 然后与Au22(SG)18纳米粒子的氨基官能团， 进行 脱水缩合反应， 得到叶酸载体。 载体表面富含谷 胱甘肽基团和叶酸基团， 毒副作用相对较小， 可 修饰性强， 具有高效药物负载能力， 更有选择性 地靶向到肿瘤内部， 为实现载药的精准输送， 癌 细胞的靶向治 疗提供参 考。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115350291 A 2022.11.18 CN 115350291 A 1.一种水相自发荧 光叶酸载体的制备 方法， 包括以下步骤： 将叶酸、 Au22(SG)18纳米粒子溶液、 N ‑羟基琥珀酰亚胺、 1 ‑(3‑二甲基氨基丙基) ‑3‑乙基 碳二亚胺和缓冲溶 液混合， 进行脱水缩合反应， 得到水相自发荧 光叶酸载体。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述叶酸、 Au22(SG)18纳米粒子溶液中 Au22(SG)18纳米粒子、 N ‑羟基琥珀酰亚胺和1 ‑(3‑二甲基氨基丙基) ‑3‑乙基碳二亚胺的摩尔 比为(0.1～0.2):(0.8～1):(0.15～0.2):(0.15～0.2)。 3.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述缓冲溶液为PBS缓冲溶液， 所述 PBS缓冲溶 液的pH值 为5.5～6.5， 浓度为90～1 10mmol/L。 4.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述PBS缓冲溶液与Au22(SG)18纳米粒 子溶液的体积比为 4:1。 5.根据权利要求1～4任一项所述的制备方法， 其特征在于， 所述脱水缩合反应的温度 为室温， 时间为24～3 6h。 6.权利要求1～6任一项所述制备方法制备得到的水相自发荧光叶酸载体， 其特征在 于， 包括金 ‑谷胱甘肽纳米复合粒子和接枝于所述金 ‑谷胱甘肽纳米复合粒子表面的叶酸基 团。 7.权利要求7 所述水相自发荧 光叶酸载体在药物转 运及示踪领域中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115350291 A 2一种水相自发荧光叶酸载体的制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及功能材料和生物材料技术领域， 尤其涉及一种水相自发荧光叶酸载体 的制备方法。 背景技术 [0002]癌症疾病是由细胞的突变积累引起， 其发生过程漫长， 并受遗传突变、 环境和生活 方式等多种因素影响， 已是人类健康的主要威胁。 虽然针对癌症的诊断程序和治疗手段都 取得了快速的进展， 但癌症的总体生存率并没有很大程度的提高。 目前， 治疗癌症的手段包 括手术治疗、 放疗和化疗， 近年来还兴起光学疗法。 而化疗仍是简单有效以及最具普适性的 治疗方法。 其原理是利用化学物质干扰癌细胞的分裂和增殖动力学过程， 阻止癌细胞的生 长， 或直接杀 死癌细胞， 从而达 到治疗目的。 [0003]因此， 多种抗肿瘤药物被广泛用于治疗癌症， 然而， 它们的毒副作用是临床应用的 主要障碍。 如食欲不振、 严重腹泻、 呕吐、 脱发等， 对患者的生存质量造成了严重的影响， 限 制了化疗在临床实践中的应用。 因此， 如何规避化疗药物带来的系统毒性并实现癌症的高 效治疗是目前的重点研究方向。 为了克服这个弊端， 使用新型的前药载体， 特异 性地靶向肿 瘤细胞从而实现癌症的精准诊断与治疗， 实现抗肿瘤药物的精准递送， 来降低传统抗癌药 物的毒副作用是一种很有前景 的策略。 与传统的治疗方式相比， 使用纳米载体传递药物具 有很多优势： (1)纳米载体可通过包埋或键合的方式负载药物提升其溶解能力； (2)纳米载 体可保证到达病灶部位的药物的生物活性， 避免生物不稳定的药物(如核酸、 蛋白质)在体 内循环时受到pH的破坏或酶的降解； (3)纳米载体可将药物 直接递送至靶区， 降低药物在非 期望靶区的积累， 从而降低系统毒性； (4)纳米载体可通过响应肿瘤部位的微环境控制药物 定时、 定点释放， 减少药物在循环过程中的渗漏， 从而达到更优的抗肿瘤活性与更低的系统 毒性。 [0004]目前， 常用的载体分为无机载体和有机载体两大类。 无机载体包括金属氧化物(超 顺磁氧化铁、 氧化镍纳米颗粒)、 金属载体(金纳米颗粒)、 介孔二氧化硅和碳基纳米载体(单 壁碳纳米管、 石墨烯氧化物)等。 有机载体包括脂质体、 聚合物、 树枝状大分子、 无机纳米颗 粒、 团聚体、 蛋白质和分子靶向纳米粒子等。 有机载体相较于无机载体具有很多优点， 如生 物相容性好、 可修饰程度高、 对所载药物有广泛的适应性、 生物利用度高、 低免疫原性以及 毒副作用小等优点。 [0005]然而， 现有载体存在低生物相容 性、 药物载荷低以及缺乏主动靶向及示踪的缺 点。 发明内容 [0006]本发明的目的在于提供一种水相自发荧光叶酸载体的制备方法， 所制备的水相自 发荧光叶酸载体具有良好的生物相容性和更高的药物有效载荷， 更有选择性地靶向到肿瘤 内部进行荧 光示踪成像， 实现精准治疗的多功能药物递送载体。 [0007]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案：说　明　书 1/5 页 3 CN 115350291 A 3